常見(jiàn)問(wèn)題
為什么有些基因預(yù)測(cè)互作且在酵母雙雜中顯示互作,但BiFC結(jié)果顯示無(wú)信號(hào)?
答:由于在酵母雙雜實(shí)驗(yàn)中BD融合誘餌蛋白有單獨(dú)激活作用,且AD融合靶蛋白如果有DNA的特異性結(jié)合,也可以單獨(dú)激活報(bào)告基因的表達(dá),導(dǎo)致最后的實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)假陽(yáng)性。有些重組還可能會(huì)破壞蛋白之間的互作,且不同外源基因的瞬時(shí)表達(dá)效率大不相同,建議在BiFC之前先做個(gè)亞細(xì)胞定位評(píng)價(jià)一下兩個(gè)基因的表達(dá)效率,以便調(diào)整兩個(gè)質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化條件。
- 上一個(gè):BiFC結(jié)果無(wú)信號(hào)或信號(hào)弱可能的原因是什么?怎么解決?
- 下一個(gè):在煙草BiFC中什么樣的光才算有效光?
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